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標臣動態(tài)
VDSpher 精睿/經(jīng)典反相液相色譜分析柱
根據(jù)流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的情況,稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜,在現(xiàn)代液相色譜中應用最廣泛,現(xiàn)代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。
反相色譜是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據(jù)溶質(zhì)極性(疏水性)的差別進行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。反相色譜中溶質(zhì)也通過疏水性相互作用分配于固定相表面,但是反相色譜固定相表面完全被非極性基團所覆蓋,表現(xiàn)出強烈的疏水性。因此,必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進行溶質(zhì)的洗脫分離。
溶質(zhì)在反相介質(zhì)上的分配系數(shù)取決于溶質(zhì)的疏水性,一般疏水性越大,分配系數(shù)越大。當固定相一定時,可以通過調(diào)節(jié)流動相的組成調(diào)整溶質(zhì)的分配系數(shù)。反相色譜主要應用于相對分子質(zhì)量低于5000,特別是1000以下的非極性小分子物質(zhì)的分析和純化。
反相介質(zhì)的商品種類繁多,其中最具代表性的是以硅膠為載體,通過表面鍵合非極性分子層制備。通過控制反應時間和溫度,可獲得性能穩(wěn)定的反相介質(zhì)。在硅膠基質(zhì)的反相填料中,以鍵合有C18、C8、C4的球形多孔填料最為常見,用途最廣。反相色譜固定相大多是硅膠表面鍵合疏水基團,基于樣品中的不同組分和疏水基團之間疏水作用的不同而分離。
色譜柱是HPLC系統(tǒng)非常關鍵的一部分,隨著色譜技術的發(fā)展,它也不斷地更新?lián)Q代,長度變得越來越短,填料顆粒也越來越細。現(xiàn)在常用的色譜柱長度在30~250 mm,顆粒直徑在1.6~5μm。顆粒類型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多鍵合相選擇的優(yōu)點,表面多孔具有反壓低、峰形好的優(yōu)點。
目前最常用的基質(zhì)是硅膠。以前填料純化技術不是很成熟,十八烷基鍵合到硅膠表面不是很完全,硅膠上總是少量的硅羥基裸露在外面。這樣就造成樣品在進行色譜分離的時候,會吸附或者鍵合在這部分硅羥基上,導致色譜峰拖尾。使用三乙胺作為封尾劑,先行與硅羥基吸附,可以使峰型改善,這個三乙胺曾經(jīng)一度成為分析界的寶貝和機密?,F(xiàn)在制造填料的技術日趨成熟,人們已經(jīng)掌握了把這部分剩余未鍵合硅膠也進行鍵合鈍化的技術,這個技術就叫作封尾。
現(xiàn)在每家色譜柱的制造商都有其獨特的鍵合技術,常規(guī)的鍵合基團有C18、C8、C4、苯基、氨基、氰基、硅膠等。C18和C8色譜柱是目前最常用、每個實驗室必備的通用型色譜柱。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基、辛烷基,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數(shù)化合物,包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。隨著每家色譜柱制造商的研發(fā),C18和C8柱的類型還在不斷增加。適用pH范圍由原來的2~8,發(fā)展到現(xiàn)在1~14,與純水相的兼容性越來越好,某些色譜柱即使長時間使用100%水相,也不會發(fā)生填料疏水塌陷。對于每位實驗人員來說,可供選擇的范圍日趨廣泛。
德國VDS Optilab色譜技術公司是具有31年開發(fā)和生產(chǎn)液相色譜柱經(jīng)驗的企業(yè),特別是運用反相液相色譜分離小分子化合物,產(chǎn)品品種和優(yōu)化的選擇更全面。用于小分子化合物色譜分離的C18固定相種類有9種、C8固定相種類有9種,按照硅膠純度不同,區(qū)分VDSpher(經(jīng)典)和VDSpher PUR(精睿)兩大系列,是同類產(chǎn)品線領域中最全供應商之一。
VDSpher 經(jīng)典/精睿反相液相色譜填料
1、反相液相色譜填料種類:
反相液相色譜填料 |
反相液相色譜填料鍵合類型 |
端基封尾技術 |
C18-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C18-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C18-M |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C18-M-E |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C18-M-SE |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C18-H |
Monomeric bonding(單層鍵合) |
Polar spacer(極性官能團嵌入) |
C18-NE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
OptiAqua C18 |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
special polar endcapping(獨特封端) |
OptiAqua C18 LL |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
special polar endcapping(獨特封端) |
C8-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C8-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C8-M |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-M-II |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-M-E |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C8-M-SE |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C8-H |
Monomeric bonding(單層鍵合) |
Polar spacer(極性官能團嵌入) |
C8-NE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-SB |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C4-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C4-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
Phenyl-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
Phenyl-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
Phenyl-B |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
CN-RP |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
CN-SE-RP |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
2、C18液相色譜填料性能-高柱效:120,000/m,當今常規(guī)反相C18液相色譜柱最高柱效的代表。


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